2022-11-15
2022-11-15 来源:转载自第三方
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(英文简称TRIS-HCl,CAS:1185-53-1)是分子式为C4H11NO3,分子量为157.6的一种有机物。TRIS-HCl是一种重要的生物缓冲剂,也可用作有机合成中间,另外,其还可用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长,线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成,此外,TRIS-HCl还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。CN109468311B专利中公开了一种提取质粒DNA的菌体裂解液、试剂盒及提取质粒DNA的方法,TRIS-HCl溶液被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,同时构成裂解所用缓冲液体系的一部分。本专利具体技术方案是:
一种提取质粒DNA的菌体裂解液由裂解缓冲液、溶菌酶、RNase A组成,裂解缓冲液的组成,具体为:每100mL裂解缓冲液中含有1.5~10g蔗糖、0.7~2.2g乙二胺四乙酸二钠、0.3~0.9g TRIS-HCl、2.7~5.4g NH4Cl、0.1~2.0mL 0.5%的Triton X-100、0.2~0.6g CaCl2、0.5~8.0g盐酸胍、0.5~3.0g异硫氰酸胍,其余量为水,菌体裂解液的pH为5.0~8.0。
本发明公开的独特的菌体裂解液,提高了裂解效率,降低了蛋白质和RNA引起的污染,同时也提高了质粒DNA与离心吸附柱的结合效率。
参考文献
CN109468311B一种提取质粒DNA的菌体裂解液、试剂盒及提取质粒DNA的方法.
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